Analisi ELISA: trascrizione

Dosaggio immunoenzimatico (ELISA) è un metodo di analisi del sangue in laboratorio, basato sulla ricerca di cellule speciali - anticorpi contro varie malattie. Il metodo consente non solo di identificare l'agente patogeno, ma anche di stabilire a che stadio si trova il processo patologico. Quest'ultimo è molto importante per la prognosi e l'ulteriore trattamento del paziente.

Vantaggi e svantaggi del metodo

Tra tutti i moderni metodi diagnostici, ELISA è la più innovativa e tecnicamente accurata. I suoi principali vantaggi sono:

1. La capacità di cercare tutti gli anticorpi esistenti alle malattie infettive nel sangue del paziente.
2. Alta disponibilità del metodo di ricerca. Ad oggi, qualsiasi laboratorio di medie dimensioni può eseguire analisi ELISA.
3. Quasi il 100% di specificità e sensibilità del metodo.
4. Capacità di cercare anticorpi e antigeni, nonché di stabilire lo stadio del processo patologico e di tracciare le sue dinamiche, grazie al confronto del numero.

Un tale numero di vantaggi rispetto ad altri test oscura completamente un unico inconveniente dell'analisi: è in grado di rilevare gli anticorpi, ma non il patogeno stesso.

Termini chiave per la valutazione dell'analisi

Per capire cosa succede l'analisi ELISA, che cos'è e come viene eseguita, è necessario conoscere i termini di base usati dagli specialisti.

1. Un anticorpo è una proteina prodotta dalle cellule. sistema immunitario umano (linfociti di tipo B). Rispondono con una reazione specifica all'ingestione di un agente o sostanza estranei. Un altro nome per gli anticorpi è le immunoglobuline, che appartengono a classi diverse: A, E, M, G. Differiscono tra loro in termini di massa, velocità di risposta, emivita e una serie di altre caratteristiche. Normalmente, il sangue umano contiene principalmente immunoglobuline di classe G. Se si verifica un'infezione, il numero di immunoglobuline A e M aumenta bruscamente. Immunoglobuline E prendere parte a reazioni allergiche.
2. Un antigene è un agente estraneo di origine organica e ad alto peso molecolare. Il più delle volte rappresenta agenti patogeni o le loro sostanze biologicamente attive.
3. Un complesso antigene-anticorpo, o complesso immunitario, è una combinazione diretta di una sostanza estranea e di un'immunoglobulina, che dà origine a una risposta immunitaria.

L'essenza e la portata del metodo

I pazienti spesso hanno una domanda: ELISA, che cos'è, come viene eseguita e a cosa serve? Puoi dire del metodo descrivendo in breve le sue fasi.

Fase preparatoria Il medico di laboratorio utilizza una speciale compressa, in cui 96 fori. Un antigene di un patogeno specifico è stato applicato alla superficie di ciascun pozzetto.

Fase 1. Viene eseguita la campionatura del sangue, che viene poi applicata goccia a goccia nel pozzetto. Nel pozzetto, viene avviata una reazione tra l'antigene e l'anticorpo nel sangue.

Stadio 2. Nel pozzo, la reazione con la formazione di immunocomplessi è in corso. Il risultato è una sostanza di un certo colore. L'intensità del colore dipende dalla quantità di anticorpi nel sangue del paziente per ogni specifico patogeno.

Fase 3. Valutazione del risultato mediante fotometria. Per fare ciò, utilizzare un dispositivo speciale chiamato "spettrofotometro". Viene utilizzato per confrontare la densità del materiale nel pozzetto e il campione di controllo. Successivamente, il dispositivo genera un risultato mediante analisi matematica.

Valutazione dei risultati e finalità del test ELISA

L'interpretazione del risultato dipende da diverse sfumature importanti:

1. Pozzi di densità ottica.
2. Produttore di piastre con fori (sistemi di test).
3. Il laboratorio in cui è stato eseguito lo studio.

Date queste sfumature, non dovresti mai confrontare due risultati provenienti da diversi sistemi di test o da diversi laboratori.

Un altro punto importante che influenza l'analisi di ELISA è la cosiddetta avidità degli anticorpi. Questo parametro caratterizza la quantità di antigene, la forza di legame nel complesso "antigene-anticorpo". La base della sua definizione è l'elaborazione del complesso immunitario dell'urea per risolvere le strutture proteiche. Questo ti permette di distruggere i legami deboli tra l'antigene e l'anticorpo e lasciare solo forti. Il valore della ricerca sull'avidità è che può essere usato per scoprire la durata dell'infezione. Questa informazione è estremamente importante per fare una diagnosi alle donne in gravidanza.

L'analisi del sangue di ELISA è:

1. Per cercare vari antigeni patogeni.
2. Per lo studio dei livelli ormonali.
3. Per l'esame per la presenza di patologia autoimmune.
4. Per rilevare i marcatori di cancro.

Varietà di ELISA

L'analisi ELISA ha le seguenti varietà:

1. Indiretto.
2. Direct.
3. Competitivo.
4. Metodo di blocco

Ma in realtà, oggi viene utilizzato solo il metodo chiamato ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima). Si basa sulla reazione sopra descritta della formazione di un complesso di antigene con un anticorpo con un cambiamento di colore sulla superficie del pozzetto.

L'analisi del sangue ELISA quantitativa merita particolare attenzione. Questo non è un tipo di analisi, ma un modo per valutare i risultati. Grazie a lui, viene contato il numero di anticorpi e le loro classi sono determinate. Il risultato dipende dalla densità ottica del campione, dal sistema di test su cui è stato eseguito l'ELISA e anche dal laboratorio.

Malattie rilevate da ELISA

ELISA è un esame del sangue che ti permette di identificare un numero enorme di varie malattie infettive. Inoltre, con la stessa accuratezza vengono rilevate sia le malattie virali che quelle batteriche. Ad esempio, utilizzando la formazione di immunocomplessi, si può provare la presenza di antigeni degli agenti causali delle seguenti malattie:

1. Epatite virale A, B e C.
2. Infezione da HIV e AIDS.
3. Virus Epstein-Barr.
4. Herpes virus di tutti i tipi.
5. Citomegalovirus.
6. Morbillo.
7. Toxoplasmosi.
8. Sifilide e molte malattie a trasmissione sessuale (MST).
9. Parassitosi e altre malattie

Inoltre, l'ELISA può rilevare:

1. Marcatori tumorali - TNF (fattore di necrosi tumorale), PSA (antigene prostatico specifico), CEA (antigene embrionale-cancro), CA-125 (marcatore tumorale ovarico)
2. Ormone della gravidanza - hCG (gonadotropina corionica).
3. Disturbi del sistema riproduttivo: ormoni del sistema riproduttivo femminile e maschile.
4. Patologia della tiroide.

È importante ricordare che il test ELISA per l'HIV di oggi è il modo principale per diagnosticare questa pericolosa malattia.

Materiale per ELISA e tecnologia di recinzione

Per eseguire l'ELISA in un paziente, il sangue viene assunto a stomaco vuoto. Inoltre, il siero è ottenuto dal sangue, che viene direttamente utilizzato per l'analisi. Inoltre, l'ELISA può essere eseguito sul liquido cerebrospinale (CSF), muco cervicale canale (cervice), liquido amniotico e persino fluido vitreo (bulbo oculare).

Prima di somministrare il sangue al paziente, vengono avvertiti che non deve assumere alcun farmaco e si raccomanda di terminare il trattamento con antibiotici e farmaci antivirali almeno due settimane prima che venga prelevato il sangue.

Tempi di ricezione e interpretazione dei risultati

La tempistica di una risposta del laboratorio non dipende dalla velocità del suo lavoro, ma da quale stadio si trova la malattia e quali anticorpi sono già comparsi nel sangue. Quindi, ad esempio: le immunoglobuline M appaiono circa 2 settimane dopo l'assunzione di sangue per l'analisi e indicano che il processo è allo stadio dell'infezione primaria o si è verificata una esacerbazione di quella cronica. Allo stesso tempo, gli anticorpi delle classi M e G compaiono durante l'infezione primaria. Inoltre, quest'ultimo può essere rilevato dopo 4 settimane.

Le IgA appaiono dopo 2-3 settimane da sole o con M, che significa infezione acuta o con G, che indica un processo cronico.

Tali diversi periodi di comparsa di anticorpi nel sangue causeranno al paziente un lungo periodo di attesa per il risultato. È accettabile attendere più di un mese dopo l'esecuzione dell'ELISA. Anche la decodifica e l'interpretazione del medico richiedono una certa quantità di tempo.