Come vengono usati i test sierologici per la diagnosi?

08/05/2019

Sierologia (dal latino Siero - siero), chiamata scienza delle proprietà siero di sangue persona. La definizione di reazioni sierologiche verrà presentata di seguito.

Uno dei compiti principali della sierologia oggi è lo sviluppo di metodi per la produzione di sieri specifici per la diagnosi e il trattamento, la valutazione del grado della loro attività e la determinazione dei meccanismi dell'esposizione umana. Un esame del sangue sierologico è un metodo di ricerca di laboratorio per determinare in antigeni di materiale biologico di un paziente o anticorpi (proteine ​​specifiche) contenuti nel siero del sangue di un paziente. Gli studi sierologici non sono considerati al 100% specifici e sensibili nella diagnosi delle malattie infettive. Pertanto, la valutazione dei risultati della ricerca è possibile solo tenendo conto del quadro clinico della malattia nel suo insieme. Gli esperti preferiscono per una diagnosi più accurata di diversi test. reazioni sierologiche

Reazioni sierologiche - che cos'è?

Nella diagnosi di laboratorio della maggior parte delle malattie infettive, viene utilizzato un metodo per rilevare gli anticorpi nel sangue del paziente che sono generati contro gli antigeni patogeni. Sono stati usati nella pratica medica dall'inizio del ventesimo secolo. Con lo sviluppo della scienza, i medici moderni hanno imparato a identificare gli antigeni nella struttura dei microbi e hanno anche rivelato la formula chimica delle loro tossine. Ciò ha permesso di sviluppare sieri destinati non solo al trattamento ma anche alla diagnosi di malattie infettive. Il siero viene prodotto somministrando agenti patogeni attenuati agli animali da laboratorio. L'impostazione delle reazioni sierologiche è ora molto popolare.

Dopo un tempo di esposizione standard, i preparativi vengono effettuati dal sangue degli animali da laboratorio. Sono utilizzati in reazioni sierologiche per identificare i microbi o le loro tossine. Il metodo si basa sulla risposta immunitaria del corpo umano. Questo studio è utilizzato nella diagnosi di malattie infettive per identificare la presenza o l'assenza di anticorpi in un paziente contro qualsiasi virus o batterio, nonché per determinare il gruppo sanguigno. Le manifestazioni esterne delle reazioni sierologiche dipendono dalle condizioni di condotta e dallo stato in cui gli antigeni si trovano nel sangue del paziente. Se i microbi non si dissolvono, si precipiteranno, si lischeranno, si legheranno o si immobilizzeranno nel siero. Se si verifica la dissoluzione degli antigeni, viene rilevato il fenomeno di neutralizzazione o precipitazione. Le reazioni sierologiche sono state utilizzate da molto tempo.

Materiale di studio

Quando si esegue uno studio sierologico utilizzando particelle di materiale biologico raccolto dal paziente: sangue, saliva, feci. In un certo numero di casi, viene esaminato il materiale raccolto in alcuni oggetti ambientali: acqua, terra.

Come sono esattamente le reazioni sierologiche eseguite in microbiologia? stadiazione reazioni sierologiche

Metodo di raccolta di materiale biologico

Con questa analisi, non è necessario preparare in modo specifico il paziente. Il prelievo di sangue viene effettuato al mattino prima dei pasti nella sala per il trattamento di un istituto medico utilizzando metodi ematologici standard. Per questa analisi, il prelievo di sangue viene eseguito con due metodi: il sangue venoso viene prelevato dalla vena cubitale e il sangue capillare viene prelevato dal dito. Il materiale per l'analisi è in tubi sigillati sterili.

Cosa è necessario per impostare reazioni sierologiche?

Caratteristiche del trasporto e stoccaggio di materiale biologico

Subito dopo aver preso il sangue, viene trasportato in un laboratorio speciale, dove il siero viene preparato lo stesso giorno. È possibile conservarlo per non più di quattro o sei giorni in frigorifero a una temperatura compresa tra 2 e 4 gradi. Se si desidera mantenere il siero per un periodo più lungo, è congelato. Per non violare la qualità del materiale biologico, il congelamento e lo scongelamento possono essere eseguiti una sola volta. La conservazione a lungo termine rende gli anticorpi inattivi e perdono alcune delle loro proprietà. Le immunoglobuline di classe M sono considerate le più sensibili alle basse temperature di conservazione.

Dopo che il siero è scongelato, è ben miscelato per ottenere una composizione omogenea. Aiuta a ripristinare la concentrazione di anticorpi contenuti in questo materiale.

uso di reazioni sierologiche

Studi sierologici: a cosa serve?

Il metodo delle reazioni sierologiche è usato per diagnosticare echinococcosi, trichinosi, toxocarosi, opistociasi, cisticercosi, toxoplasmosi, amebiasi, giardiasi. Questo è necessario al fine di determinare l'efficacia del ciclo di trattamento prescritto, nonché per rilevare la ricorrenza della malattia che ha seguito il recupero del paziente. Dov'è l'uso più comune delle reazioni sierologiche?

Metodi diagnostici di base

Nella maggior parte dei casi, i microbiologi e gli immunologi applicano la reazione di agglutinazione, precipitazione, neutralizzazione, reazione con la partecipazione del complemento, usando anticorpi marcati e antigeni (metodi radioimmunologici, immunofermentali, immunofluorescenti).

Agglutination Reaction (RA)

Il test sierologico di agglutinazione viene eseguito in modo semplice e allo stesso tempo molto chiaro. Ciò consente di determinare rapidamente se gli antigeni contengono il siero del paziente. La reazione viene utilizzata per diagnosticare febbre tifoide paratifo e tifo. Si basa su una specifica interazione tra anticorpi umani (agglutinine) e microbi (agglutenogeni). Nel processo della loro interazione, la formazione di particelle precipita. Questo è un segno positivo. Per la reazione, è possibile utilizzare agenti microbici vivi o uccisi, funghi, protozoi, cellule del sangue e cellule somatiche. Lo studio chimico viene effettuato con separazione in due fasi: al primo stadio gli anticorpi vengono miscelati con antigeni, seguiti dalla precipitazione (si forma l'agglutinato) durante la reazione. definizione della reazione sierologica

Il metodo diagnostico sierologico potrebbe essere diverso.

Agglutinazione indiretta di reazione (RPGA)

Questa reazione è considerata più sensibile della precedente. È usato per diagnosticare malattie causate da vari batteri, parassiti intracellulari, protozoi. Questa analisi può rilevare la concentrazione di anticorpi, anche in quantità molto basse. Per la sua attuazione è necessario utilizzare globuli rossi purificati di ovini e globuli rossi umani, pre-trattati con anticorpi o antigeni (a seconda di ciò che vogliono trovare in laboratorio). In alcuni casi, utilizzando globuli rossi di immunoglobulina umana. Si ritiene che la reazione sierologica dei globuli rossi venga mantenuta se i globuli rossi si precipitano sul fondo della provetta. Quando le cellule si trovano sotto forma di una cupola invertita e occupano l'intero fondo del tubo, ciò indica una reazione positiva. Si considera una reazione negativa se i globuli rossi si depositano sotto forma di una colonna o di un pulsante nel mezzo del fondo.

Sono condotti test sierologici per la sifilide. reazioni sierologiche metodo diagnostico sierologico

Reazione di reazione (RP)

Per identificare particelle estremamente piccole di antigeni, viene utilizzata la reazione di precipitazione. Questa può essere una proteina (o parte di essa), composti di proteine, lipidi o carboidrati, batteri parzialmente rappresentati e le loro tossine. Il siero per analisi che usa questa reazione si ottiene infettando gli animali da laboratorio, di solito i conigli. Questo metodo viene utilizzato per ottenere quasi tutti i siero precipitante.

Il meccanismo della reazione di precipitazione sierologica è simile in effetti alla reazione di agglutinazione. Gli anticorpi che sono contenuti nel siero sono mescolati con antigeni in soluzione colloidale connettendosi a grandi molecole proteiche. Queste molecole sono depositate sul fondo del tubo o su un substrato di gel. Questa versione dello studio è considerata estremamente accurata e, con il suo aiuto, è possibile rilevare anche dosi trascurabili della sostanza. La reazione di precipitazione, che è anche ampiamente utilizzata nella medicina legale, consente di diagnosticare la peste, la tularemia, l'antrace, la meningite.

Reazioni di questo tipo vengono eseguite non solo in un mezzo liquido, ma usano gel di agar per questo scopo. Questa procedura è chiamata metodo di precipitazione diffusa. Offre l'opportunità di studiare complesse miscele antigeniche. Nel gel, gli anticorpi e gli antigeni si muovono l'uno verso l'altro a velocità diverse e, una volta incontrati, creano linee di precipitazione lungo le quali si conclude una conclusione.

Cos'altro è noto metodo di reazione sierologica?

Neutralization Reaction (PH)

I sieri antitossici neutralizzano l'azione delle esotossine prodotte dai microrganismi. La risposta sierologica di questo tipo si basa su questa interazione. In microbiologia, questo metodo viene utilizzato per la titolazione di sieri, tossine e toxoidi, nonché per la designazione della loro attività terapeutica. Inoltre, utilizzando questa reazione, è possibile determinare l'identità dell'esotossina per un particolare tipo o tipo. Il tetano, la difterite e il botulismo vengono diagnosticati in questo modo. Lo studio viene eseguito sia sul tablet che nel substrato in gel.

Inoltre, le reazioni sierologiche sono utilizzate per altri test. reazioni sierologiche microbiologia

La reazione di lisi (RL)

Il siero che entra nel corpo del paziente è dotato, oltre al compito funzionale principale di fornire l'immunità passiva, con proprietà dissolventi. Contribuisce alla dissoluzione di microbi, elementi cellulari alieni e virus che entrano nel corpo del paziente. A seconda della composizione degli anticorpi, il siero è suddiviso in batteriolizine, citolitine, spirochetolizine, emolisine e altre. Questi anticorpi sono chiamati complimenti. Gli anticorpi contengono quasi tutti i fluidi del corpo umano, hanno una struttura proteica complessa e sono molto sensibili all'aumento della temperatura, agitazione, esposizione ad acido e luce solare diretta. Ma in uno stato secco sono in grado di mantenere le loro proprietà lisanti per un massimo di 6 mesi.

Le seguenti reazioni sierologiche di questo tipo di sangue sono eseguite: batteriolisi, emolisi.

La reazione di batteriolisi viene effettuata utilizzando il siero del paziente e il siero immunitario specifico con microbi attivi. Se c'è abbastanza complimento nel sangue, il tecnico di laboratorio sarà testimone della lisi dei batteri e la reazione sarà considerata positiva. Il secondo tipo di reazione sierologica di questo tipo è che gli eritrociti del paziente vengono processati usando siero, che contiene emolisine, che vengono attivate solo se c'è qualche tipo di complimento. Se è presente, il ricercatore osserverà la dissoluzione dei globuli rossi. Questo metodo viene utilizzato quando si esegue la reazione di Wasserman (sifilide). reazioni sierologiche alla sifilide

Compliment Binding Reaction (RSK)

Questo studio viene utilizzato per rilevare gli anticorpi contro l'infezione nel sangue del paziente e per identificare gli agenti patogeni in base alla loro struttura antigenica. Tutte le precedenti reazioni descritte sono considerate semplici. CSC è una reazione complessa, poiché coinvolge non due, ma tre componenti: un anticorpo, un antigene e un complimento. L'essenza di esso consiste nell'interazione tra l'anticorpo e l'antigene, che si verifica solo in presenza di proteine ​​del complemento, adsorbite sul complesso AG-AT formato. Gli antigeni dopo aver aggiunto un complimento cambiano in modo significativo, sono queste trasformazioni che mostrano la qualità della reazione. Questo può essere lisi, emolisi, immobilizzazione, azione battericida o batteriostatica.

Le reazioni di cui sopra differiscono le une dalle altre dalla tecnica di produzione, ma tutte hanno fondamentalmente una reazione di interazione antigene-anticorpo e vengono utilizzate per identificarle. Esistono diversi tipi di reazioni sierologiche con un principio d'azione simile.