Mercoledì Endo. La composizione e la preparazione del mezzo nutritivo

Qualsiasi amante della microbiologia sa che la coltivazione di qualsiasi colonia richiede un mezzo nutritivo appropriato. Allo stesso tempo, ogni mezzo nutritivo ha le sue caratteristiche, sia nella preparazione che nell'uso. Se decidi di far crescere una colonia di enterobatteri, avrai bisogno dell'ambiente di Endo. Questo è esattamente ciò di cui tratta questo articolo.

Cos'è questo terreno nutriente?

Ambiente Endo è utilizzato per la rimozione di enterobatteri e ha un carattere diagnostico differenziale. Perché si chiama così? È molto semplice - prende il nome dal suo scopritore - Shigeru Endo. Questo è un famoso microbiologo di origine giapponese.

Qual è la particolarità di questo ambiente?

Non è un segreto che in microbiologia c'è il concetto di batteri gram-positivi e gram-negativi. Quindi, se si decide di coltivare una colonia di batteri gram-negativi, per questo è necessario un ambiente che inibisca la crescita dei batteri gram-positivi. Questa funzione può essere facilmente gestita dall'ambiente Endo. Grazie alle sue proprietà selettive, impedisce lo sviluppo di colonie gram-positive.

Composizione media

Le caratteristiche di qualsiasi ambiente dipendono principalmente dagli ingredienti. La composizione dell'ambiente Endo comprende:

• solfato di sodio;
• fosfato di sodio;
• agar di peptone di carne;
• magenta;
• carbonato di sodio;
• lattosio.

A causa del basso costo della preparazione, l'ambiente Endo è molto richiesto tra i microbiologi dilettanti.

Qual è il principio dell'ambiente?

Solfuro di sodio e fucsina presenti nella sua composizione contribuiscono alla formazione del reagente di Schiff. Cioè, il solfuro di sodio scolorisce il fucsino. Come risultato di questa reazione, si forma acido fuchsulfurico.

Tutti sanno che le colonie enterobatteriche sono in grado di fermentare il lattosio, durante questa reazione si forma l'acido formico. Dal corso della chimica è noto che l'acido formico interagisce con le aldeidi e dà una reazione qualitativa. A causa di ciò, la colonia di enterobatteri sarà dipinta in un colore rosa-cremisi. Altri batteri gram-positivi (eccetto gli enterobatteri) non possono diffondere il lattosio, pertanto non si macchiano.

Di conseguenza, solo gli enterobatteri sotto forma di bastoncini cremisi risaltano sulla piastra di Petri con il mezzo Endo, che ha un colore rosato. Tutte le altre colonie saranno distrutte o non si distingueranno dallo sfondo del mezzo nutritivo.

Cottura del substrato nutriente

In microbiologia, l'ambiente Endo è uno dei più importanti mezzi nutrienti. Per prepararti a questo tipo di supporto, segui semplicemente le istruzioni di seguito.

1. Brodo di cottura. Qualsiasi carne o osso con carne rimanente farà, è necessario rimuovere il grasso e tendini il più possibile. Cuocere la carne per circa 20-25 minuti a 100 gradi. Dopo aver raffreddato il brodo per congelare le gocce di grasso.

2. Filtra il brodo risultante attraverso un filtro di cotone denso per ottenere una trasparenza assoluta. Va notato che il filtraggio attraverso la garza è indesiderabile, in quanto vi è il rischio di colpire piccoli pezzi di carne.

3. Pesare i restanti ingredienti. Dobbiamo creare un ambiente asciutto e preparare un reagente Schiff. Per questo è necessario pesare:

• peptone 1,3 g;
• lattosio 1 g;
• agar 2 g;
• Fuchsin 0,2 g

4. Aggiungere il fucsin in 30 ml di acqua, mescolare il fucsin con acqua. Quindi aggiungere una soluzione concentrata di solfito di sodio fino a quando il colore fucsia non scompare.

5. Un precipitato di acido fuchsulfurico precipita, rimuovendo questo precipitato per filtrazione.

6. Aggiungi il terreno caldo al brodo caldo.

7. Attendere la dissoluzione e aggiungere il reagente di Schiff.

8. Il substrato risultante viene sterilizzato per circa 30 minuti ad una temperatura di circa 125 gradi.

I risultati delle colture devono mantenere circa 5 giorni, ma più a lungo li tratti, più chiaro sarà il risultato di colonie di batteri.